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1. 實驗準(zhǔn)備:用無菌注射器吸取3%硫代乙醇酸鈉3ml,注射于小鼠腹腔內(nèi)。
2. 四日后,注射1%羊紅細(xì)胞懸液1ml 于小鼠腹腔內(nèi)。
3. 注射1 小時后,將小鼠用頸椎脫臼法處死,解剖暴露腹腔,于腹腔靠上部位,用鑷子輕輕夾起腹膜,將腹膜剪一小口,用尖吸管注入5ml 預(yù)溫的PBS,同時用手反復(fù)揉搓腹腔約1—2 分鐘,以便盡可能多地沖洗出小鼠腹腔的吞噬細(xì)胞。
4. 用尖吸管吸取腹腔液,置入潔凈試管內(nèi)。
5. 用尖吸管將腹腔液吹打均勻(盡量避免產(chǎn)生氣泡),吸取一滴滴于載玻片上,加蓋玻片鏡檢。
6. 觀察結(jié)果,也可以將腹腔液涂片,平放于濕盤內(nèi),37℃,孵育30 分鐘。取出涂片,用預(yù)溫的PBS 沖洗3 次,然后用甲醇固定1 分鐘,以瑞氏染液1 份加pH6.4 的PBS 2 份混勻后,滴于涂片上染色5-10 分鐘,以蒸餾水沖洗(切勿先將染液傾去)后,待干,鏡檢。
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原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司
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