1  材料與方法

標(biāo)本收集  用無菌管收集臨床與檢驗(yàn)確診為乙型病毒性肝炎患者的血清，該檢測取HBsAg、HBeAg、HBcAb均為陽性并且HBsAg的S/CO值在10��0以上者，外觀需無溶血、脂血、黃疸、無污染、清晰透明。收集20份左右，約10 ml，充分混勻，分裝后置4 ℃和-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?br />

實(shí)驗(yàn)方法

確定稀釋度  用滅活雙蒸水稀釋混合血清成不同稀釋倍數(shù)，嚴(yán)格按照試劑盒操作說明，常規(guī)條件下與衛(wèi)生部臨檢中心提供臨界值血清同測，測得1/400倍時(shí)，其OD、S/CO值與衛(wèi)生部臨檢中心提供的臨界值血清接近。

分裝備用  將混合血清作1/400倍的大批量稀釋，其中小牛血清占15%，二甲亞砜占0��5%，疊氮鈉占0��3%,混勻滅菌分裝，冷藏和冰凍保存。

 標(biāo)本處理  取4 ℃和-20 ℃冰箱保存的質(zhì)控血清，置56 ℃ 10 h滅活后離心沉淀，過濾除菌。

 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法  所有指標(biāo)用OD均值x，SD的均值S，以x±S表示，采用SPSS 10��0軟件統(tǒng)計(jì)，比較采用配對t檢驗(yàn)。

    2  結(jié)果

　�。�1）取1/400倍稀釋血清連續(xù)20次重復(fù)測定，可得OD的均值，SD的均值，S/CO的值，兩種試劑、兩種批號的結(jié)果差異不大。（2）將4 ℃冷藏1周和-20 ℃冷凍1個月的稀釋血清隨機(jī)抽取質(zhì)控血清，連續(xù)檢測20次，可得OD的均值，SD的均值。CV為5��3%左右，S/CO的均值為1��16。 不同廠家連續(xù)檢測室溫質(zhì)控血清HBsAg的結(jié)果表2  質(zhì)控血清在不同溫度保存后測得的結(jié)果比較

    3  討論

　　（1）在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作進(jìn)行中，測得S/CO均值為1��15，保證實(shí)驗(yàn)的可靠性，且該實(shí)驗(yàn)質(zhì)控血清顯示結(jié)果時(shí)顏色較淺，但肉眼仍可與陰性對照明顯區(qū)別。

（2）按我國臨床實(shí)驗(yàn)室條件和試劑生產(chǎn)水平，衛(wèi)生部HBsAg（ELISA）臨界值血清標(biāo)準(zhǔn)為2 ng/ml［1］。其OD值約為0��056左右，S/CO均值為1��15，SD為0��002593，CV為4��6%,4 ℃和-20 ℃保存后連續(xù)檢測結(jié)果OD值在0��059左右，SD值約為0��002900，CV約為5��3%，S/CO的均值為1��16。說明該自制質(zhì)控血清較穩(wěn)定。

（3）該質(zhì)控血清是臨界與陰性的弱陽性血清，這種低值血清能檢測出，為低值陰性標(biāo)本的檢出提供參照，其他低值的陽性標(biāo)本就不易漏檢

（4）選試劑盒時(shí)，試劑盒是否符合要求，通過自制質(zhì)控血清及衛(wèi)生部臨檢中心提供臨界血清隨同當(dāng)日標(biāo)本檢測，可客觀地比較各廠家試劑盒及其不同批號的靈敏度，對試劑質(zhì)量起監(jiān)督作用

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司