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點(diǎn)擊次數(shù):14979 發(fā)布時(shí)間:2014/3/10 10:40:32
抗體是完成免疫組織化學(xué)染色的主要試劑,可將其分為特異性一抗(或稱一級抗體)和第二抗體(或稱二級抗體,也可稱為二抗或標(biāo)記二抗),尤其特異性一抗更為重要。目前國內(nèi)外市場各種特異性抗體日益增多,銷售公司也很多,大多數(shù)使用者直接選用市售現(xiàn)成商品。
抗體質(zhì)量的好壞是完成免疫組化工作的關(guān)鍵,目前可從二條途徑獲得。首先可從市場上獲得商品化抗體,這是主要來源。但有時(shí)為了研究或證實(shí)一種新的抗原成分,而又無相應(yīng)抗體可購買時(shí),往往需要自己制備抗血清。當(dāng)然,也可以從文獻(xiàn)上查找,并向作者索要。
原則上應(yīng)選擇在較高稀釋度時(shí)染色較佳、背景較低、結(jié)果穩(wěn)定、重復(fù)性好的商品化抗體。目前供IHC研究和診斷用的抗體種類繁多,制造商如林,不同廠家的相同抗體,其價(jià)格、包裝及抗體的*佳工作濃度差異較大。在選購時(shí),應(yīng)多聽取有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)專家的意見。另外,還應(yīng)考慮抗體的種屬。
一般用于診斷、鑒別診斷的抗體*常見的是兔和小鼠的單克隆抗體,并注明可用于診斷,其價(jià)格也較昂貴;而用于研究用的抗體,其種屬較多,例如兔、小鼠、羊、大鼠和雞的抗體等,其價(jià)格相對廉價(jià),品種較新。購買抗體前要了解清楚是否與實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的檢測試劑配套和能用于何種切片類型檢測,例如冰凍切片或石蠟切片,一般需購置能用于石蠟切片檢測的。
此外,還應(yīng)了解清楚是否需要何種前處理(酶消化或抗原修復(fù)),以及抗體的*佳稀釋度等問題。購置能用于石蠟切片,稀釋度在1:100以上的抗體。
在購置用于實(shí)驗(yàn)研究檢測的抗體時(shí),應(yīng)認(rèn)真閱讀其產(chǎn)品的說明介紹。因?qū)嶒?yàn)研究用的抗體種類特別繁多,而且很新,檢測的對象往往是各種動(dòng)物標(biāo)本,如狗、兔、猴、大鼠、小鼠、豬等。
各廠家生產(chǎn)的抗體,尤其是基因抗體,往往是針對人、或某種動(dòng)物的,或各種動(dòng)物有交叉,但有一部分抗體只針對人或鼠,對其他動(dòng)物無交叉反應(yīng),如需檢測犬類或兔組織標(biāo)本中的某些抗原時(shí),就無法檢測到。因此,在選擇此類抗體時(shí),一定注意掌握其背景資料。
另外,購置抗體后,一定請公司告知其生產(chǎn)日期、商品號(cat,lot)、檢測范圍和用何種前處理方式等。
原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司
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