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技術(shù)文章

ELISA試劑盒操作步驟中“包”的重要性

點(diǎn)擊次數(shù)：14925 發(fā)布時(shí)間：2015/6/15 11:45:32

在一般的概念里，不需復(fù)雜設(shè)備，甚至完全手工加樣、洗板和肉眼判讀結(jié)果，便可完成該技術(shù)的操作。隨著人們對(duì)質(zhì)量控制意識(shí)的加強(qiáng)，盡可能做到限度的減少系統(tǒng)誤差，以及減少勞動(dòng)強(qiáng)度等觀念的不斷改進(jìn)，解決elisa試劑盒技術(shù)中加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過程的系統(tǒng)誤差問題及高效率運(yùn)作問題導(dǎo)致了自動(dòng)化概念的形成。ELISA技術(shù)的加樣、溫育、洗板及判讀結(jié)果過程的科學(xué)地、有機(jī)地、系統(tǒng)地結(jié)合，盡可能地減少各環(huán)節(jié)的人為因素的影響，便成為自動(dòng)化ELISA技術(shù)的理論基。
說到ELISA試劑盒加樣、溫育、洗板等步驟，可還記得其中那個(gè)“包”包是非常重要的，接下來就讓我司錢經(jīng)理為大家講解下這個(gè)“包”
1、包是非常重要的，蛋白質(zhì)濃度，原來的性質(zhì)是否降解，抗體，使你可以識(shí)別，從而節(jié)省抗原是非常重要的，我做的重組蛋白，他嚴(yán)厲警告我必須在冰浴是緩慢的融化是真理。有一些涂層可不是蛋白質(zhì)，生物素和脂類或小分子，我們的裝修之前涂，我簡要如下： 2460親和素-生物素抗生物素蛋白涂層：載體，加入生物素標(biāo)記的，這種鍍膜的方法均勻，牢固，ELISA試劑盒已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原定量測定。脂質(zhì)：可以在有機(jī)溶劑（如酒精）孔加入溶解后，打開冰箱隔夜或冷干，待酒精揮發(fā)，在固體表面上進(jìn)行自然干燥的固體脂質(zhì)。小分子必須依靠和大的載體蛋白偶聯(lián)可以固定在固體載體上。
2、包衣液的選擇，碳酸鹽緩沖液通常選擇9。6。但有時(shí)因?yàn)闇y試需求，數(shù)據(jù)包緩沖溶液是一種特殊的原料可采用中性包裝。應(yīng)注意以下原則：蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合，取決于在固相的疏水性基團(tuán)和疏水性相互作用的載體表面蛋白分子的結(jié)構(gòu)，物理吸附是非特異性的，蛋白分子量，等電點(diǎn)，大集中，小分子蛋白蛋白質(zhì)通常含有疏水基團(tuán)越多，所以更容易吸附在固相載體表面。測試也有很強(qiáng)的理論于實(shí)踐，看*后一個(gè)可以應(yīng)用到我們的測試。除了剛才提到的9。6碳酸鹽緩沖液常用的涂料溶液，和磷酸鹽緩沖液和7-8 7。2 -緩沖。
3、關(guān)閉：以下包之后是無關(guān)的蛋白質(zhì)溶液濃度高，涂層工藝。隨函附上使大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙，和干擾物質(zhì)的免疫排斥和吸附步驟。ELISA試劑盒常用的密封：0。05% - 0。5%牛血清白蛋白；10%或1%明膠牛血清；ELISA檢測試劑盒脫脂奶粉，價(jià)格相對(duì)低廉，可用于高濃度（5%～10%）；和一些罕見的使用各種動(dòng)物血清（主要是為了消除類似的蛋白和酪蛋白等干擾）。但到底選擇什么，根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體實(shí)踐。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司