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技術(shù)文章

ELISA檢測實驗中復(fù)孔稀釋的重要性

點擊次數(shù)：14794 發(fā)布時間：2015/9/16 10:21:30

雖說ELISA檢測法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點，但是在實驗中或多或少會出現(xiàn)一些問題，復(fù)孔的稀釋也不例外，ELISA檢測試驗中的復(fù)孔稀釋的重要性你知道嗎？
近日，山西大學(xué)曾老師來電表明了自己的實驗疑惑：“設(shè)計ELISA復(fù)孔檢查時，是對同一個樣品作兩次稀釋，再分別加到板上的兩個孔，還是只稀釋一次，然后吸取兩次分別加到兩個孔？前者似乎把稀釋時的誤差也考慮到了，但做出來的結(jié)果兩個孔相關(guān)挺大的。而較常使用的是哪種稀釋方法？"

為了減小誤差，是先稀釋再加樣。而針對這位客戶所遇到的疑問，我公司技術(shù)人員是這樣解說的：

1. 前者測的是稀釋和移液的誤差，后者只有移液誤差。

2. 一般都是稀釋一次，分兩孔吧。同濃度的分復(fù)孔。

3. 由于是從同一原液稀釋，一般不考慮稀釋誤差（稀釋誤差是存在的），都是稀釋到想要的倍數(shù)直接分孔（而不是一一稀釋，這樣可以使稀釋誤差減小）。

4. 復(fù)孔是為了排除移液體積，板的影響，以及其他系統(tǒng)誤差的，要求復(fù)孔的濃度是一致的。稀釋后分孔能滿足此要求，一一稀釋不能。

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