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ELISA實(shí)驗(yàn)加血清樣及反應(yīng)試劑操作技術(shù)要點(diǎn)

點(diǎn)擊次數(shù)：14788 發(fā)布時(shí)間：2016/2/17 10:22:14

ELISA實(shí)驗(yàn)方法操作標(biāo)準(zhǔn)，用于ELISA測定的標(biāo)本*為常用的是血清(漿)，有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。在處理和保存方面要考慮以下幾個(gè)方面：
1.要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。
2.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細(xì)菌污染。
3.血清標(biāo)本如是以無菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時(shí)間保存，應(yīng)在-70℃以下。
4.冰凍保存的血清標(biāo)本須注意避免因停電等造成的反復(fù)凍融。
Elisa實(shí)驗(yàn)方法操作標(biāo)準(zhǔn)，加血清樣本及反應(yīng)試劑：
在現(xiàn)在的ELISA商品試劑盒中，血清樣本的加入幾乎是的要使用微量加樣器加入樣本的步驟。使用微量加樣器加樣必須注意的關(guān)鍵點(diǎn)是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加，除了要注意滴加的角度外，滴加的速度也很重要，滴加太快，很容易出現(xiàn)重復(fù)滴加或加在兩孔之間的現(xiàn)象，這樣就會(huì)在孔內(nèi)的非包被區(qū)出現(xiàn)非特異吸附，從而引起非特異顯色。所以，有時(shí)候一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯(cuò)誤所致。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司