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選擇Elisa試劑盒先聽上海恒遠(yuǎn)說幾句

點擊次數(shù)：14846 發(fā)布時間：2017/10/25 9:51:59

   Elisa實驗的結(jié)果影響主要有兩個因素，一個是試劑盒的因素，另一個便是操作因素。實驗操作需要大家按要求操作，并積累經(jīng)驗。針對選擇elisa試劑盒先聽上海恒遠(yuǎn)說幾句，主要有以下兩點：

一、根據(jù)實驗室要求
    一般Elisa檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶，而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色，可以通過分光光度計進(jìn)行檢測，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上，也可以結(jié)合在二抗上，還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。此外Elisa的結(jié)果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。
    單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于Elisa試劑盒，實際上有時候二者結(jié)合效果更好。

    如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個因素。盡管現(xiàn)在購買源自指定動物的抗體越來越容易，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行Elisa檢測時，檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合，實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗，來避免上述問題。

二、根據(jù)Elisa類型
    雖然Elisa方法試劑盒有著多種類型，不過它們都有一個共同特點，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cell Elisa和酶聯(lián)免疫斑點ELISPOT是兩種特殊的類型，In-cell Elisa需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測。ELISPOT有點像蛋白印跡Western blot，先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞，然后在膜上檢測細(xì)胞分泌的抗原形成斑點。此外，我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是384孔板進(jìn)行Elisa實驗。

    注意：在購買Elisa試劑盒時，看其產(chǎn)品供應(yīng)商，比如索要三證、咨詢技術(shù)等方式，從而進(jìn)一步了解供應(yīng)商的可靠性。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司