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技術(shù)文章

ELISA試劑盒競爭法測抗原的操作小秘訣(帶圖解)

點(diǎn)擊次數(shù):15483   發(fā)布時(shí)間:2018/4/25 11:40:25

    我公司熱銷全國的優(yōu)質(zhì)試劑盒采用ELISA方法,主要作用有:①免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位;②顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng);③定量檢測體液中抗原或抗體成份;④研究抗酶抗體的合成。ELISA實(shí)驗(yàn)方法也可以分有多種類型,今天上海恒遠(yuǎn)公司為您帶來了*新技術(shù)資訊,下面一起來看看elisa試劑盒競爭法測抗原的操作小秘訣!

1.包被抗體:用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至*適濃度(1~10μg/ml),每凹孔加0.3ml,4℃過夜,或37℃水浴3小時(shí),貯存冰箱。

2.洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。

3.分2組,a組加酶標(biāo)記抗原和被檢抗原混合液0.2ml,b組只加酶標(biāo)記抗原液0.2ml,37℃作用1~2小時(shí)。(混合液可作成不同稀釋度)

4.洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。

5.加入0.2 ml底物溶液于每個(gè)凹孔(OPD或OT),室溫作用30分鐘(另作一空白對照,0.4ml底物加0.1ml終止劑)。

6.加終止劑:每凹孔加2M H2SO4或2M檸檬酸0.05ml。

7.用酶標(biāo)比色計(jì)測定a、b兩組OD值,并求出a、b、OD值的差數(shù)。
          
    本方法首先將特異性抗體吸附于固相載體表面,我們把抗原和抗體吸附到固相載體表面的這個(gè)過程,稱為包被,也可叫做致敏。經(jīng)洗滌后分成兩組:一組加酶標(biāo)記抗原和被測抗原的混合液,而另一組只加酶標(biāo)記抗原,再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色,這兩組底物降解量之差,即為我們所要測定的未知抗原的量。

    這種方法所測定的抗原只要有一個(gè)結(jié)合部位即可,因此,對小分子抗原如激素和藥物之類的測定常用此法。該法的優(yōu)點(diǎn)是快,因?yàn)橹挥幸粋(gè)保溫洗滌過程。但需用較多量的酶標(biāo)記抗原為其缺點(diǎn)。

ELISA競爭法測抗原示意圖:

            
    以上技術(shù)內(nèi)容供大家參考學(xué)習(xí),如有不太清楚的地方或了解更多,可以隨時(shí)聯(lián)系到我公司咨詢詳情。上海恒遠(yuǎn)公司為大家供應(yīng)優(yōu)質(zhì)TSZ、R&D、BIM品牌進(jìn)口ELISA試劑盒,提供全程技術(shù)指導(dǎo)及免費(fèi)代檢測服務(wù)。

公司簡介:
    上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司隸屬于上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司于2008年成立,是一家生物技術(shù)企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)及銷售。主要產(chǎn)品有進(jìn)口BIM/RD/TSZ elisa試劑盒、elisa試劑盒價(jià)格、國產(chǎn)elisa試劑盒、進(jìn)口elisa試劑盒、放免試劑盒、血清、抗體、生物科研試劑、實(shí)驗(yàn)耗材等。


原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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