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血漿游離血紅蛋白測(cè)定方法

點(diǎn)擊次數(shù):15383   發(fā)布時(shí)間:2012/8/3 11:05:43

ELISA試劑盒分析:血漿游離血紅蛋白測(cè)定方法

實(shí)驗(yàn)原理

  血紅蛋白具有類(lèi)過(guò)氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無(wú)色*終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測(cè)出其含量。
實(shí)驗(yàn)方法
  材料:
  1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
  2.1%H2O2
  3.10%醋酸溶液
  4.分光光度計(jì)
  方法:
  1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
  2.按下表進(jìn)行操作,用分光光度計(jì),波長(zhǎng)為530nm,以空白管調(diào)零,測(cè)定測(cè)定管的吸光度。

試劑 (ml)
測(cè)定管
空白管
2 g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液
0.5
0.5
患者血漿
0.02
/
1% H2O2
0.5
0.5
混勻后室溫放置10min
10%醋酸溶液
5.0
5.0
室溫放置10min

  3.計(jì)算公式
  血漿游離Hb(mg/L)=測(cè)定管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×100
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
  參考范圍:0-40mg/L
注意事項(xiàng)
  1.一切容器避免血紅蛋白污染;
  2.采血要順利,器皿要干燥,檢測(cè)血漿要新鮮,及時(shí)分離,防止人為溶血;
  3.鄰聯(lián)苯胺溶液具致癌性,檢測(cè)時(shí)要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
  4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準(zhǔn)確

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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