由于生化測試測量的吸光度為相對吸光度，所以從理論上來講，所有終點法的測試都需要把試劑本身的吸光度扣除（試劑本身的吸光度就是試劑空白）。在傳統(tǒng)手工法中,每次測定至少做三個管:測定管、標準管、空白管，其中空白管是試劑加蒸餾水，測出來也就是試劑空白。因為操作環(huán)境、儀器狀態(tài)、試劑穩(wěn)定性等變異，所以要求每次都要測定試劑空白，稱為實時試劑空白。

在全自動分析儀上，大都是模擬手工操作，許多全自動分析儀為追求速度，在設(shè)計上采用折中方法來測定試劑空白。以日立全系列生化儀為例，該系列分析儀做不了實時試劑空白，因為它們?nèi)窍燃訕颖竞蠹釉噭�，為了折中，在定標時做一個試劑空白，保存起來，需要扣除試劑空白時再減這個預先保存的值。對于日立的這種試劑空白測定很多儀器都采用這種方法，也叫做試劑空白校準。

在自動生化儀上的試劑空白一般表現(xiàn)為零點吸光度，該吸光度是通過校準確立的。

2、樣本空白：

由于溶血、脂血、黃疸等情況，會導致樣本本身的吸光度對測試結(jié)果造成影響。所以對樣本本身吸光度的測量，即樣本空白，可以去除這方面的影響，測量方法是按照正常測試的試劑和樣本量，把試劑換成蒸餾水或生理鹽水來進行測量。自動生化儀上，很難界定樣本空白。與消除樣本空白有關(guān)的大約有如下幾點:

①在雙試劑測定時，加入試劑和樣品后的吸光度可一定程度上扣除樣本空白。（故有單試劑不能扣除樣本空白的說法）。
②現(xiàn)在的試劑抗干擾能力都較強，比如雙試劑，R1加入后先和樣本孵育一段時間，將血紅蛋白、脂肪、膽紅素等反應掉，再加入R2開始測定反應，在一定范圍內(nèi)都可以消除樣本空白。

③現(xiàn)代全自動生化儀大多采用雙波長測定，雙波長測定的原則是根據(jù)干擾組分和待測物質(zhì)吸收光譜的峰形特征，選擇兩個波長和，使干擾組分在這兩個波長處的吸光系數(shù)相等，使待測物質(zhì)在兩波長處的吸光系數(shù)有顯著差別。以兩波長分別測定分析溶液的吸光度，以兩個吸光度值之差（△A）計算。這也可以扣除一部分樣本空白。

④有些儀器,例如日立系列,有“血清信息”功能的設(shè)置，做法單獨占用一個空白通道來計算，叫做樣品空白校準。

3、水空白：

比色杯在加入水以后的吸光度。水空白的意義主要是對光路系統(tǒng)進行檢查和校正，如光源，比色杯等，同時在計算中起到消除“杯差”的作用。日立7060中的Cell Blank（杯空白）測定的就是水空白。

原創(chuàng)作者：上海恒遠生物技術(shù)發(fā)展有限公司