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鱟試劑的試驗方法

閱讀次數(shù)：974 發(fā)布時間：2022/11/1 10:12:45

鱟的身上流淌著一種十分珍奇的血液。這種血液是淡藍色的。這種淡藍色的血液中含銅量很高，而且一遇到細菌就會凝固。利用鱟血液的這種特殊反應(yīng)，對它進行處理，可以制成一種特殊的檢驗試劑－－"鱟試劑"。鱟試劑可以準確、快速地檢測人體內(nèi)部組織是否因細菌感染而致病;在制藥和食品工業(yè)中，也可用它對毒素污染進行監(jiān)測。

凝集反應(yīng)的原理來定性檢測或半定量濁度法和顯色基質(zhì)法。則鱟試劑可分為:凝膠法鱟試劑、動態(tài)濁度法鱟試劑、終點濁度法鱟試劑、動態(tài)顯色法鱟試劑和終點顯色法鱟試劑。凝膠法鱟試劑通過與內(nèi)毒素細菌內(nèi)毒素檢查法包括兩種方法，即凝膠法和光度測定法，后者又包括產(chǎn)生內(nèi)毒素的方法。動態(tài)濁度法鱟試劑、終點濁度法鱟試劑、動態(tài)顯色法鱟試劑和終點顯色法鱟試劑則都是定量檢測內(nèi)毒素的。

選擇合適的操作方法與順序，在鱟試劑的使用過程中尤為重要。在操作過程中要注意以下幾點:

(1) 實驗室要求潔凈、無塵埃流通;檢驗人員同時注意衛(wèi)生的保持。在整個使用操作過程中應(yīng)防止微生物的污染，例如空氣的流動，人員的口沫、汗液污染等。

安瓿外瓶壁臟物、瓶壁碎片、砂輪(2) 鱟試劑開啟、溶解和配制時應(yīng)盡量避免將鋸屑等異物混入鱟試劑中，避免鱟試劑外損。

(3) 鱟試劑中含有多種蛋白質(zhì)，用力振搖會產(chǎn)生氣泡，一旦起泡難以消除，而影響檢測的準確性，所以在整個操作過程中都要輕力以避免因過分震動而引起的誤差。

(4) 量取和加樣反應(yīng)物時，一定要加到試管底部接近鱟試液而不接觸鱟試液的管壁處。

緩沖能力較強或偏酸、堿的供試品，應(yīng)考慮供試品的pH值。氯化鈉注射液、葡萄糖注射液(5) 生成凝膠的適pH值為6~8，對于(5%,10%)等注射液，不需考慮供試液的pH值，而檢查其他制劑時，尤其是一些本身

內(nèi)毒素及樣品混合液中時反應(yīng)已開始，并在一定的溫度范圍內(nèi)，反應(yīng)溫度越高，反應(yīng)速率越大;保溫時間的增長，也會提高鱟試劑的靈敏度，增加假陽性的發(fā)生，導(dǎo)致較大誤差。因此，要注意控制溫度的變化和保溫時間。(6) 使用時要嚴格控制溫度和時間。當鱟試劑一加入

干熱滅菌處理，待烤箱溫度升至設(shè)定的溫度后開始計時，干烤至少1h。也可用其他經(jīng)確證不干擾細菌內(nèi)毒素(7) 保持實驗器具的潔凈。每次檢驗完畢，應(yīng)及時將玻璃器具充分清洗后于250℃的檢查的適宜方法。對于塑料、橡膠等不耐熱器材可用30%雙氧水浸泡4h，用無熱原水沖洗，70℃干燥備用。

鱟試劑的貯存

檢驗誤差。雖然凍干的鱟試劑在常溫條件下是相對穩(wěn)定的，但還是應(yīng)存放在2℃~8℃下，避免長時間放置在高于25℃的溫度條件下導(dǎo)致因貯藏不當、質(zhì)量下降而引起的